بررسی ویژگی های آنتی اکسیدانی عصاره هیدروالکلی کلزا و تاثیر آن بر اضطراب موش سوری تحت استرس مزمن در مدل ماز بعلاوه ایی شکل مرتفع

Antioxidant properties of Brassica napus hydro-alcoholic extract and its influences on the anxiety of mice under chronic stress in elevated plus maze model.


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
مجری و همکاران
مجری و همکاران
دانلود
دانلود
علوم پزشکی بابل
علوم پزشکی بابل

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد رهگیری طرح 9441210
کد مصوب طرح 9441210
کد طرح در واحد ارائه دهنده 3391
شماره ثبت در دبیرخانه
عنوان فارسی طرح بررسی ویژگی های آنتی اکسیدانی عصاره هیدروالکلی کلزا و تاثیر آن بر اضطراب موش سوری تحت استرس مزمن در مدل ماز بعلاوه ایی شکل مرتفع
عنوان لاتین طرح Antioxidant properties of Brassica napus hydro-alcoholic extract and its influences on the anxiety of mice under chronic stress in elevated plus maze model.
محل اجرای طرح دانشکده پزشکی
رسته مطالعاتی پایه
سازمان مجری
تاریخ ارائه طرح 1394/09/04
تاریخ تصویب 1394/09/17
تاریخ شروع 1394/09/17
تاریخ خاتمه 1396/03/17
تاریخ خاتمه مصوب شورا
وضعیت گردش کار طرح های در دست اجرا

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
نسیم پالیزیانمجریمجری اول nasimpalizban@yahoo.com
محمود برادرانمجریمجری دومدکتری تخصصیm_baradaran2@yahoo.com
علی اکبر مقدم نیاهمکار اصلیهمکار اصلیدکتری تخصصیmoghadamnia@gmail.com
منوچهر اشرف پورهمکار اصلیهمکار اصلیدکتری تخصصیmnrashrafpour@yahoo.com
سهراب کاظمیهمکار اصلیهمکار اصلیدکتری تخصصیkazemi.msm@gmail.com
داود واعظیهمکار اصلیسایر davod_vaez@yahoo.com
روزبه واعظیهمکار اصلیسایر rozbah_vaez@yahoo.com

· فلاونول(سیب، پیاز قرمز، انجیر، قارچ ،مورلا، کاسنی) · فلاونون(کنگر فرنگی، پونه کوهی، پرتقال، لیمو، گریپفروت) · فلاون(کلم، انگور قرمز، جعفری، فلفل سبز) · آنتوسیانین(مویز اقطی، شاه توت، نخود)(5). مصرف معمول فلاونوئید ها از طریق ایجاد اثرات آنتی اکسیدانی و کمک به واکنش های آنزیمی از ابتلا به انواع زیادی از بیماری ها مانند سرطان و بیماری های قلبی و عروقی و اختلالات عصبی ممانعت بعمل می آورند (4). مطالعات نشان داده اند که مصرف این ترکیبات از ابتلا به افزایش فشار خون جلوگیری میکند وهمچنین این ترکیبات خاصیت آنتی اسکلروتیک دارند به گونه ای که با جلوگیری از اکسیداسیون لیپو پروتئین های کم چگال مانع از تجمع آنها درعروق خونی می شوند. فلاونوییدها با فعال سازی آنزیم نیتریک اکساید سنتتاز باعث گشادی عروق و کاهش التهاب عروق می گردد. ترکیبات فلاونوییدی در بازسازی و عملکرد درست سلول های عصبی نیز نقش دارند به طوری که با ایجاد اثرات محافظتی نقش سودمندی بر اعمال شناختی بوجود آورده و در نتیجه از ابتلا به طیفی از بیماری ها مانند آلزایمر و پارکینسون جلوگیری می نمایند. علاوه بر این فلاونویید ها با افزایش آنژیوژنز و رشد سلول های عصبی باعث عملکرد بهتر اعصاب محیطی و مرکزی شده و خطر ایجاد بیماری های نورودژنرانتیو را در سنین بالا کاهش می دهند. فلاونویید ها در پیشگیری از سرطان نیز در دو سطح آغاز و ادامه ی سرطان عمل می کند. در مرحله آغاز با جلوگیری از تقسیم سلولی،افزایش ترمیم نوکلئیک اسید ها، و مبارزه با استرس اکسیداتیو و در مرحله ادامه ی سرطان با انجام آپوپتوز سلول های سرطانی ، مهار آنژیوژنز آنها و تولید سایتوتوکسیک سایتواستاتین علیه این نوع سلولها فعالیت می کنند(5). امروزه ترکیبات فلاونوئیدی به شکل مصنوعی به عنوان محافظت کننده های طبیعی غذا ها نیز مورد استفاده قرار می گیرند. اما این ترکیبات مصنوعی در مقایسه با ترکیبات طبیعی اثرات جانبی دارند. در نتیجه ضرورت استفاده از آنتی اکسیدان ها و وجود عوارض جانبی در آنتی اکسیدان های مصنوعی لزوم استفاده از ترکیبات آنتی اکسیدانی گیاهی را آشکار می کند (6 و 5). گیاه براسیکا از جمله گیاهان با مصرف زیاد در سراسر جهان است که به علت داشتن ترکیبات فعال با خاصیت آنتی اکسیدانی از جمله ویتامین E، C، کارتنوییدها، ترکیبات فنولیک و فلاونوییدها ی توانند اثرات سودمندی بر حفظ سلامت ایجاد نمایند. همچنین گیاه براسیکا ناپا به دلیل داشتن ترکیباتی نظیر گلوکز فروکتوز سوکروز و رافینوز و لینولیک اسید توکوفرول لیکوپن کلروفیل و خواص آنتی اکسیدانی از فواید بسیاری بر خوردار است و هم چنین به علت علاقه به مصرف آن و فراوانی و کشت آسان باعث شده تا برای خواص تغذیه ای و درمانی مورد توجه قرار گیرد(7). امروزه از گیاه براسیکا ناپا(کلزا) به منظور تولید روغن استفاده می کنند که روغن حاصل از آن در مقایسه با روغن آفتابگردان، سویا و ذرت به دلیل وجود اسیدهای چرب اشباع نشده و کلسترول پایین ؟از اهمیت بیشتری برخورد دار است (8). اضطراب anxiety)) یکی از شایع ترین مشکلات سلامت روان در جوامع امروزی بوده و شیوع آن در حال افزایش است به گونه ای که تقریبا از هر 5 نفر 1 نفر اضطراب را به طور مدام و یا بیشتر مواقع تجربه می کند. اختلالات اضطرابی به عنوان مهمترین عامل خطر برای بسیاری از بیماری ها از جمله بیماری های قلبی ،متابولیکی و عصبی-روانی مطرح هستند (10) .مسئله ی اضطراب هنوز به صورت یک مسئله ی تحت مطالعه و بررسی است و محققین برای تشخیص و درمان آن همچنان می کوشند(11) و ارائه درمان های موثر برای اختلالات اضطرابی از اهمیت زیادی برخوردار است. امروزه گروه داروهای مختلفی جهت درمان اضطراب مورد استفاده قرار می گیرند که از جمله می توان به بنزودیازپین ها اشاره کرد. بنزودیازپین ها یکی از شایع ترین داروهایی است که در زمینه های نورولوژی و روانپزشکی مورد استفاده قرار می گیرد.از مهمترین کاربرد این دارو ها می توان به درمان اختلالات اضطرابی و بی خوابی اشاره کرد.مطالعات اخیر نشان داده اند که این داروها فقط در درمان های کوتاه مدت اختلالات اضطرابی بهترین اثر را داشته اند و استفاده از این دارو ها در درمان های بلند مدت به علت وجود عوارضی (مانند ایجاد وابستگی در مصرف،زیان رساندن به دستگاه سایکوموتور،اختلالات حافظه ای،سرگیجه،عدم تعادل و دیس آرتری) موفقیت آمیز نبوده است(11). مهارکننده های انتخابی سروتونین (SSRI) از جمله دیگر داروهایی هایی است که امروزه برای اهداف درمانی اضطراب به کار برده می شوند.این داروها بر طیف گسترده ای از اختلالات اضطرابی اثر میگذارند با این وجود که اثرات درمانی آنها با مقدار متنوعی از عوارض جانبی همراه است مانند:تغیرات وزنی،بی خوابی،خواب آلودگی،بی قراری، خستگی،خشکی دهان،مشکلات گوارشی،سردرد و..علاوه بر این مطالعات اخیر نشان داده که میزان موفقیت داروهای ضد افسردگی در درمان حدودا 50 درصد می باشد.بنابراین ضررهای درمان های مداخله ای دارویی باعث شده تا درمان های دیگری از جمله درمان های گیاهی برای درمان این گونه اختلالات مورد بررسی قرار گیرد(10). علیرغم وجود طیفی از داروها جهت کنترل اضطراب اما همچنان کنترل اضطراب از چالش های درمان طبی محسوب می شود و از طرف دیگر مصرف این داروها با عوارض جانبی زیادی همراه است بنابراین لازم است مطالعاتی جهت شناسایی و معرفی ترکیبات جدید بویژه با منشا طبیعی که انتظار می رود با عوارض جانبی کمتری همراه باشند دارای اهمیت زیادی است. بنابراین با توجه به آنچه که گفته شد مطالعه حاضر به منظور بررسی خواص آنتی اکسیدانی، تعیین اثرات ضد اضطرابی و نیز اندازه گیری مواد موثره عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا طراحی شده است. فهرست کلی فصول هدف از اجراهدف کلی طرح: بررسی ویژگی های آنتی اکسیدانی عصاره هیدروالکلی کلزا و تاثیر آن بر اضطراب بعد از قرار گرفتن در شرایط استرس بی حرکتی مزمن در مدل ماز شعاعی مرتفع فرضیاتاهداف و فرضیات: # نوع هدف یافرضیه عنوان هدف یافرضیه 1 هدف اصلی تعیین ویژگی های آنتی اکسیدانی عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا، ترکیبات موثره ونیز تعیین اثرات عصاره گیاه بر اضطراب موش های سوری که تحت استرس بی حرکتی مزمن قرار گرفته اند. 2 هدف فرعی اندازه گیری میزان خاصیت آنتی اکسیدانی تام عصاره هیدروالکلی کلزا با استفاده از روش FRAP در موش های سوری که تحت استرس بیحرکتی مزمن قرار گرفته اند. 3 هدف فرعی تعیین ویژگی (scavenging effect) عصاره هیدرو الکلی گیاه کلزا با روش DPPH در موش های سوری که تحت استرس بیحرکتی مزمن قرار گرفته اند. 4 هدف فرعی تعیین اثر عصاره هیدرو الکلی گیاه کلزا بر رفتار اضطرابی موش های سوری که تحت استرس بیحرکتی مزمن قرار گرفته اند در روش ماز شعاعی مرتفع 5 هدف فرعی تعیین ویژگی دوز-پاسخ اثرات ضد اضطرابی احتمالی عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا در موش های سوری که تحت استرس بیحرکتی مرمن قرار گرفته اند 6 هدف فرعی تعیین محتوی مواد موثره مختلف از جمله ترکیبات فنلی و فلاونوئیدی موجود درعصاره هیدرو الکلی گیاه کلزا 7 فرضیه عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا می تواند فعالیت آنتی اکسیدانی تام موش های سوری تحت استرس بیحرکتی مزمن را در روش FRAP افزایش دهد. 8 فرضیه عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا فعالیت Scavenging را در موش های سوری تحت استرس بیجرکتی مزمن افزایش میدهد. 9 فرضیه درمان با عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا می تواند سبب کاهش رفتار اضطرابی موش های سوری تحت استرس بیحرکتی مزمن در مدل ماز شعاعی مرتفع گردد. 10 فرضیه عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا می تواند اثرات ضد اضطرابی وابسته به دوز در موش های سوری تحت استرس بیحرکتی مزمن در مدل ماز شعاعی مرتفع بوجود آورد. 11 فرضیه عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا دارای مقادیر قابل قبولی از مواد موثره مختلف از جمله ترکیبات فنلی و فلاونوئیدی می باشد. چه موسساتی می توانند از نتایج طرح استفاده نمایند ؟ در صورت ساخت دستگاه نظر صنعت و داوران کلمات کلیدی روش پژوهش وتکنیکهای اجراییخلاصه روش اجرا طرح: این مطالعه به منظور تعیین اثرات آنتی اکسیدانی و ضد اضطرابی عصاره ی هیدروالکلی گیاه کلزا در موش های سوری تحت استرس بیحرکتی مزمن و در طی چند مرحله و به شرح زیر انجام خواهد شد: 1)جمع آوری گیاه: برای انجام تحقیق حاضر نمونه گیاه کلزا از مزارع شهرستان بهشهر استان مازندران و در بهار سال 1394 تهیه و به آزمایشگاه منتقل گردید.پس از شستسوی گیاه ابتدا قسمت های گل برگ و ساقه از ریشه ی آن جدا شده خرد شده و در دستگاه انکوباتور رطوبت خود را از دست داده و در نهایت همراه با ریشه ی خرد شده در هاون بصورت پودر در آمد . 2) تهیه ی عصاره هیدروالکلی کلزا برای تهیه عصاره این گیاه از روش خواباندن استفاده شده است برای این منظور ابتدا پودر حاصل از تمامی قسمت های گیاه را درون بشر ریخته و اتانول 80 درصد به آن افزوده خواهد شد.پس از گذشت 72 ساعت این مخلوط از کاغذ صافی عبور داده شده تا مایع از مخلوط کلزا و الکل جدا شود. سپس این مایع در چندین شیشه ریخته و در طی 72 ساعت اجازه داده می شودد تا اتانول آن بخیر شود (19) 3)حیوانات آزمایشات بر روی موش های سوری نر با محدوده وزنی 20 تا 30 گرم انجام خواهد شد. بدین منظور حیوانات در شرایط استاندارد (دمای 24-21 درجه ی سانتی‌گراد و سیکل روز/شب 12ساعت/12ساعت و رژیم غذایی نرمال آزمایشگاهی) و به مدت یک هفته نگهداری میشوند.این موش ها از حیوان خانه دانشگاه علوم پزشکی بابل تهیه خواهند شد. 4) روش القای مدل استرس بی حرکتی مزمن در این روش موش های سوری مورد آزمایش به مدت معلوم در قفس های تنگ که محدود کننده نام دارند (RESTRAINER) نگه داری می شوند که در این مطالعه موش های سوری به مدت 10 روز به صورت پیاپی و هر روز به مدت 60 دقیقه در این قفس ها نگه داری می شوند تا از حرکت حیوان ممانعت شود. در آخرین جلسه استرس مزمن آزمون سنجش رفتار اضطرابی حیوان با روش EPM انجام می گیرد20 7) :EPM(elevated plus maze)یکی از گسترده ترین روش های استفاده شده در اندازه گیری رفتاراضطرابی در مدل حیوانی می باشد. دستگاهی که از آن استفاده می شود به شکل علامت "به علاوه" بوده که دو بازوی آن باز و دو بازوی دیگر از اطراف بسته اما سقف هر 4 بازو باز است و حدودا 40 تا 70 سانتی متر ارتفاع دارد و موش می تواند آزادانه بین بازو ها حرکت نماید. میزان رفتار اظطرابی مدل بر اساس ترجیح مدل به بودن در بازوی باز نسبت به بودن در بازوی بسته اندازه گیری می شود که می توان این اندازه گیری را یا از روی تعداد ورود به بازوهای باز و یا از روی زمانی که در بازو های باز میگذراند، محاسبه گردد(21). بازوی بسته به عنوان محیط آرام و بازوی باز به عنوان محیط اضطرابی در نظر گرفته می شود(22). برای این منظور،به هر موش قبل از تست به طور جداگانه، عصاره ی مورد نظر را بصورت داخل صفاقی تزریق نموده و بعد از 30 دقیقه، در جعبه ای به ابعاد 30×40×10 سانتیمتر قرار میگیرد تا فعالیت جستجو گرانه (Explorative activity) حیوان افزایش یابد. هر موش به طور جداگانه در مرکز EPM قرار می گیرد. به طوری که سرش به سمت بازوی باز باشد. موش ها به مدت 5 دقیقه مورد مشاهده قرار میگیرند و تعداد ورود به بازوی باز، ورود به بازوی بسته، زمان سپری شده در هر بازو اندازه گیری می شود. تنها زمانی که هر 4 پنجه ی موش در بازوی مربوطه قرار گرفت به عنوان زمان سپری شده و ورود به بازو در نظر گرفته می شود)24 و23). در EPM زمان سپری شده در بازوی باز به صورت زیر محاسبه می شود: = %100 مدت زمان سپری شده در بازوی باز (ثانیه) ×÷ مدت زمان کل در طول مشاهده (300 ثانیه) در EPM درصد ورود به بازوی باز به صورت زیر محاسبه می شود: = %100 × دفعات ورود به بازوی باز ÷ تعداد کل دفعات ورود به بازوی باز و بسته شاخص های استاندارد ارزیابی اضطراب از طریق مشاهده آنها بررسی و فعالیتهای جستجوگرانه ثبت میگردد. افزایش ورود به بازوهای باز و افزایش مدت سپری شده در بازوی باز شاخص کاهش اضطراب در موش تلقی میشود.همچنین قضاوت در مورد اختلاف معنی دار سطح اضطراب بدین صورت است که اگر همزمان هر دو شاخص ( تعداد ورود به بازوی باز و مدت سپری شده در آنها) در یک راستا کاهش یا افزایش یابد و حداقل یکی از آنها تفاوت معنی داری با گروه کنترل داشته باشد،به عنوان تغییر معنی دار سطح اضطراب تلقی میشود(25و24). علاوه بر بررسی خواص ضد اضطرابی عصاره گیاه براسیکا ناپا به بررسی خواص آنتی اکسیدانی این گیاه نیز پرداخته می شود که بدین منظور بعد از القای استرس بیحرکتی مزمن و تاثیر دوزهای مختلف عصاره هیدروالکلی کلزا بر رفتار اضطرابی موش سوری ، نمونه های لازم برای بررسی اثرات آنتی اکسدانی از موش های مورد مطالعه گرفته می شود برای این منظور از روش های FRAPو DPPHاستفاده می شود. 5) سنجش فعالیت آنتی اکسیدانی: در این مطالعه از دو روش FRAP, DPPH برای تعیین فعالیت آنتی اکسیدانی تام عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا و همچنین سنجش تاثیر Scavenging آن استفاده میشود. برای سنجش فعالیت آنتی اکسیدانی تام از روش FRAP استفاده خواهد شد. FRAP (Ferric Reducing Ability of Plasma): یک روش ساده برای اندازه گیری فعالیت آنتی اکسیدانی تامTotal antioxidant power می باشد. مکانیسم این روش بر اساس احیای Ferric tripyridyltriazinecmplex [Fe(3)-TPTZ] به Ferrous tripyridyltriazine [Fe(2)-TPTZ] درPH پایین می باشد(26). زمانی که antioxidant وجود دارد باعث احیای Fe(3) به Fe(2) می شود.Fe(2)به دست آمده از واکنش احیا یک رنگ آبی را که دارای بالاترین جذب در3 pm59 دارد،ایجاد میکند.میزان رنگ آبی ایجاد شده وهمچنین میزان فاکتور تولید شده Fe(2)میزان Reducing ability یا antioxidant activity را مشخص می کند.این روش برای مایعات ، پلاسما عصاره داروها و عصاره ی گیاهی و هربال کاربرد دارد(27).برای اندازه گیری پتانسیل آنتی اکسیدانی تام سرم موش از طریق FRAP، از روش بنزی و استرین استفاده خواهد شد(28). برای این منظور، معرف FRAP بو از طریق حل نمودن mL 5/2 از محلول 10میلی مولار (mM 10 در mM 40 هیدروکلریک اسید)، mL 25 از بافراستات mM/L 300 با pH6/3 و mL 5/2 از محلول mM 20 فریک تری کلراید هگزاهیدرات (کلرورفریک) (نسبت 10:1:1) تهیه و سپس انکوبه نمودن محلول حاصل در دمای °C 37 آماده میشود(29). سپس در هر مرحله به هر لوله ی آزمایش300 میکرولیتر از معرف FRAP و 10 میکرولیتر از سرم موش اضافه کرده و لوله ها را به مدت 10 دقیقه در دمای 37 درجه ی سانتی گراد انکوبه میکنیم و بعد میزان جذب نوری لوله ها را در طول موج 593 نانومتر اسپکتوفتومتر در مقابل بلانک (300 میکرولیتر معرف FRAP + 10 میکرولیتر آب مقطر) میخوانیم(28). غلظت های 125، 250، 500 و 1000 میکرومول در لیتر از فریک سولفات هپتاهیدرات (FeSO4.7H2O) به عنوان محلول استاندارد شناخته می شود(29).قابل ذکر است که از فعالیت آنتی اکسیدانی ویتامین E به عنوان استاندارد جهت مقایسه اثرات آنتی اکسیدانی عصاره مورد مطالعه استفاده خواهد شد. 2.در قسمت بعدی مطالعه برای سنجش ویژگی Scavenging Effect عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا از روش DPPH استفاده خواهد شد در این روش :DPPH(2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl) این روش برای بررسی آنتی اکسیدان ها بسیار ساده و حساس می باشد و برای اندازه گیری فعالیت آنتی اکسیدانی در عصاره های گیاهی و دیگرمنابع بیولوژیکی کاربرد دارد.(30) روش کار DPPHبر اساس این است که ماده ی دهنده ی هیدروژن آنتی اکسیدان محسوب میشود و ترکیباتی که رادیکال ها را به دام می اندازند را اندازه گیری می کند.DPPH· یکی از رادیکال های آزاد نیتروژنی ارگانیک میباشد که به مقدار کمی پایدار بوده و قابل دسترس است که این DPPH·هیدروژن را از آنتی اکسیدان دریافت می کند. اثر آنتی اکسیدانهای موجود در نمونه ی آزمایش در این روش با مقداری از DPPH·که از بین برده و به DPPH تبدیل میکند ارزیابی می شود.اندازه گیری DPPH· با اسپکترومتر بسیار ساده و آسان است. DPPH·در اسپکترومتر بیشترین مقدار جذبی را در 517 نانومتر دارد و رنگ بنفش را تولید می کند.زمانی که DPPH· از آنتی اکسیدان هیدروژن دریافت کرده وبه DPPH تبدیل می شود، نمونه از بنفش به زرد تغییر رنگ می دهد.بنابراین اثر آنتی اکسیدان ها به دنبال کاهش جذب از 517 نانومتر (نقطه جذب DPPH·) به سمت 310(نقطه جذب DPPH) ارزیابی می شود (31). برای این منظور، میزان 3 میلی لیتر DPPH(1.0 میلی مولار اتانولی) استوک ساخته شده را داخل کوت ریخته و میزان جذب را توسط اسپکتوفتومتر در طول موج 517 نانومتر میخوانیم. سپس 20 میکرولیتر از سرم موش را به آن اضافه کرده و بعد از 30 دقیقه مجددا عدد جذب را میخوانیم. در نهایت با استفاده از فرمول زیر، فعالیت به دام اندازی رادیکال های آزاد DPPH را محاسبه میکنیم: =درصد بازدارندگی[(A0 – As)/A0]×100 در فرمول بالا، A0 جذب کنترل (حاوی همه ی اجزای واکنشگر بدون نمونه) و As جذب نمونه میباشد (32و33). (6 اندازه گیری ترکیبات فلاونوییدی و فنولی: بر این اساس عصاره ی هیدروالکلی گیاه کلزا به آزمایشگاه تخصصی فرستاده خواهد شد و با استفاده از دستگاه GC/MS میزان کلی ترکیبات فنولی و فلاونوییدی تخمین زده خواهد شد. گروه بندی: در این مطالعه برای هر گروه 6 موش سوری نر با وزن مناسب در نظر گرفته می شود،سپس آزمایشات به صورت زیر انجام خواهد شد: 1)گروه کنترل منفی:گروه بدون استرس که فقط نرمال سالین دریافت خواهند نمود2)گروه درمانی اول گروه بدون استرس که % 2.5 عصاره را را دریافت میکنند. 3) گروه بدون استرس 0.5% عصاره را دریافت می کنند 4)گروه بدون استرس که 5% عصاره را دریافت می کنند. 5):گروه استرس که %0.5 کلزا را دریافت میکنند. 6):کروه با استرس که % 2.5 کلزا را دریافت میکند. 7):گروه با استرس که %5 کلزا را دریافت میکنند. 8):گروه با استرس که فقط نرمال سالین دریافت می کنند. 9)گروه کنترل مثبت:گروه با استرس که دیازپام با دوز 1میلی گرم درکیلو گرم(34)دریافت می کنند. 10) گروه بدون استرس که تحت درمان با دیازپام قرار خواهند گرفت. در هر گروه بعد از وزن کردن محلول ها به صورت داخل صفاقی و با استفاده از سرنگ انسولین تزریق خواهد شد. برای تهیه ی کلزای 0.5%،0.05 گرم از عصاره کلزا در 10 سی سی حلال(نرمال سالین) حل خواهد شد. همچنین برای تهیه ی کلزای 2.5%،0.25گرم عصاره با 10 سی سی حلال و کلزای 5%،0.5 گرم عصاره با 10 سی سی حلال مخلوط شده، سپس حجم 10 میلی لیتر به ازای هر 1000 گرم وزن موش از محلول با درصد مورد نظر تزریق خواهد شد.(19) گروه های مورد آزمایش به مدت 10 روز محلول های ذکر شده را در 1 نوبت دریافت خواهند کرد که 2 ساعت پس از دریافت محلول ها در یک اتاق آرام داخل پلکسی گلاس به مدت یک ساعت قرار خواهند گرفت.در روز 11 پس از تزریق محلول های مورد نظر، بعد از 5 دقیقه مورد آزمایش EPM قرار خواهند گرفت(35). تجزیه و تحلیل آماری داده های حاصل از این مطالعه با نظر متخ دلایل ضرورت و توجیه انجام کار تعریف مسالهمقدمه و بیان مساله: آنتی اکسیدان ها ترکیباتی هستند که به عنوان عامل محافظت کننده از طریق مقابله با استرس اکسیداتیو نقش های مهمی بر عهده دارند. استرس اکسیداتیو عدم تعادل میان میزان پیش اکسیدان ها و عوامل آنتی اکسیدان است که با برتری میزان پیش اکسیدان ها در سلول ها و بافت ها همراه است که تجمع این مواد در بدن منجر به اختلالات عملکرد دستگاه های مختلف بدن میگردد (1). رادیکال های آزاد اسید ها ی نوکلئیک، پروتئین ها و چربی ها را اکسیده نموده و از این طریق می توانند آغاز گر بیماری های تخریب کننده متعددی باشند. عوامل متعددی باعث افزایش پیش اکسیدان ها شده که از جمله این عوامل میتوان به استرس ها ی روانی اشاره نمود (2). افراد مختلف به علت تفاوت های ژنتیکی در مقابل آنتی اکسیدان ها تحمل های متفاوتی دارند. نشان داده شده که قرار گرفتن طولانی مدت در معرض عوامل اکسیدان از فاکتور های مستعد کننده ابتلا به بیماری های التهابی باشد. استرس های روانی نیز سمیت اکسیداتیو را افزایش می دهند. مدارکی مبنی بر اثر افزاینده پیش اکسیدان ها توسط استرس روانی وجود دارد که افزایش این پیش اکسیدان ها با فعال کردن مسیر اکسیداتیو منجر به مهار ترمیم ژنوم انسان می گردد.(3). افزایش استرس اکسیداتیو منجر به بیماری های متعدد دیگری هم میشود که از مهمترین آنها می توان سرطان و سندرم متابولیک را نام برد.سندرم متابولیک خود باعث افزایش فشار خون، افزایش چربی، چاقی، مقاومت به انسولین، کبد چرب و نیز افزایش ریسک بیماری های قلبی عروقی و دیابت می شود.آنتی اکسیدانها می توانند در درمان و پیشگیری از این بیماری ها بسیار موثر واقع گردند (4). ویژگی خاص و اصلی آنتی اکسیدان ها توانایی آن ها در به دام انداختن پیش اکسیدان ها و یا رادیکال های آزاد میباشد آنتی اکسیدان ها را می توان به دو گروه اندوژن و اگزوژن (ویتامین ها و فلاونویید ها) تقسیم بندی کرد.اندروژن ها خود شامل دو دسته ی آنزیمی(سوپراکسید دسموتاز کاتالاز و گلوتاتین پراکسیداز) و غیر آنزیمی(اسید اوریک، بیلی روبین و آلبومین) است (3) که از جمله آنتی اکسیدان ها با منبع اگزوژن می توان به گیاهان اشاره نمود. گیاهان منابع بزرگی از ترکیبات آنتی اکسیدان هستند که به واسطه داشتن طیف وسیعی از عوامل آنتی اکسیدان حائز اهمیت زیادی می باشند. از جمله مهم ترین ترکیبات آنتی اکسیدان با منشا گیاهی میتوان به کارتنوئیدها ,فلاونوئیدها ,سینامیک اسید,بنزوئیک اسید, فولیک اسید, آسکوربیک اسید, توکوفرول و توکوترینول اشاره نمود (4).از میان ترکیبات آنتی اکسیدانی فلاونویید ها خود به زیر گروه های دیگری مانند فلاونون، فلاون، فلاونول آنتوسیانین تقسیم می شوند که هر کدام خاصیت مخصوص به خود را دارند. نمونه های گیاهی در مورد هر کدام از این ترکیبات عبارتند از: · فلاونول(سیب، پیاز قرمز، انجیر، قارچ ،مورلا، کاسنی) · فلاونون(کنگر فرنگی، پونه کوهی، پرتقال، لیمو، گریپفروت) · فلاون(کلم، انگور قرمز، جعفری، فلفل سبز) · آنتوسیانین(مویز اقطی، شاه توت، نخود)(5). مصرف معمول فلاونوئید ها از طریق ایجاد اثرات آنتی اکسیدانی و کمک به واکنش های آنزیمی از ابتلا به انواع زیادی از بیماری ها مانند سرطان و بیماری های قلبی و عروقی و اختلالات عصبی ممانعت بعمل می آورند (4). مطالعات نشان داده اند که مصرف این ترکیبات از ابتلا به افزایش فشار خون جلوگیری میکند وهمچنین این ترکیبات خاصیت آنتی اسکلروتیک دارند به گونه ای که با جلوگیری از اکسیداسیون لیپو پروتئین های کم چگال مانع از تجمع آنها درعروق خونی می شوند. فلاونوییدها با فعال سازی آنزیم نیتریک اکساید سنتتاز باعث گشادی عروق و کاهش التهاب عروق می گردد. ترکیبات فلاونوییدی در بازسازی و عملکرد درست سلول های عصبی نیز نقش دارند به طوری که با ایجاد اثرات محافظتی نقش سودمندی بر اعمال شناختی بوجود آورده و در نتیجه از ابتلا به طیفی از بیماری ها مانند آلزایمر و پارکینسون جلوگیری می نمایند. علاوه بر این فلاونویید ها با افزایش آنژیوژنز و رشد سلول های عصبی باعث عملکرد بهتر اعصاب محیطی و مرکزی شده و خطر ایجاد بیماری های نورودژنرانتیو را در سنین بالا کاهش می دهند. فلاونویید ها در پیشگیری از سرطان نیز در دو سطح آغاز و ادامه ی سرطان عمل می کند. در مرحله آغاز با جلوگیری از تقسیم سلولی،افزایش ترمیم نوکلئیک اسید ها، و مبارزه با استرس اکسیداتیو و در مرحله ادامه ی سرطان با انجام آپوپتوز سلول های سرطانی ، مهار آنژیوژنز آنها و تولید سایتوتوکسیک سایتواستاتین علیه این نوع سلولها فعالیت می کنند(5). امروزه ترکیبات فلاونوئیدی به شکل مصنوعی به عنوان محافظت کننده های طبیعی غذا ها نیز مورد استفاده قرار می گیرند. اما این ترکیبات مصنوعی در مقایسه با ترکیبات طبیعی اثرات جانبی دارند. در نتیجه ضرورت استفاده از آنتی اکسیدان ها و وجود عوارض جانبی در آنتی اکسیدان های مصنوعی لزوم استفاده از ترکیبات آنتی اکسیدانی گیاهی را آشکار می کند (6 و 5). گیاه براسیکا از جمله گیاهان با مصرف زیاد در سراسر جهان است که به علت داشتن ترکیبات فعال با خاصیت آنتی اکسیدانی از جمله ویتامین E، C، کارتنوییدها، ترکیبات فنولیک و فلاونوییدها ی توانند اثرات سودمندی بر حفظ سلامت ایجاد نمایند. همچنین گیاه براسیکا ناپا به دلیل داشتن ترکیباتی نظیر گلوکز فروکتوز سوکروز و رافینوز و لینولیک اسید توکوفرول لیکوپن کلروفیل و خواص آنتی اکسیدانی از فواید بسیاری بر خوردار است و هم چنین به علت علاقه به مصرف آن و فراوانی و کشت آسان باعث شده تا برای خواص تغذیه ای و درمانی مورد توجه قرار گیرد(7). امروزه از گیاه براسیکا ناپا(کلزا) به منظور تولید روغن استفاده می کنند که روغن حاصل از آن در مقایسه با روغن آفتابگردان، سویا و ذرت به دلیل وجود اسیدهای چرب اشباع نشده و کلسترول پایین ؟از اهمیت بیشتری برخورد دار است (8). اضطراب anxiety)) یکی از شایع ترین مشکلات سلامت روان در جوامع امروزی بوده و شیوع آن در حال افزایش است به گونه ای که تقریبا از هر 5 نفر 1 نفر اضطراب را به طور مدام و یا بیشتر مواقع تجربه می کند. اختلالات اضطرابی به عنوان مهمترین عامل خطر برای بسیاری از بیماری ها از جمله بیماری های قلبی ،متابولیکی و عصبی-روانی مطرح هستند (10) .مسئله ی اضطراب هنوز به صورت یک مسئله ی تحت مطالعه و بررسی است و محققین برای تشخیص و درمان آن همچنان می کوشند(11) و ارائه درمان های موثر برای اختلالات اضطرابی از اهمیت زیادی برخوردار است. امروزه گروه داروهای مختلفی جهت درمان اضطراب مورد استفاده قرار می گیرند که از جمله می توان به بنزودیازپین ها اشاره کرد. بنزودیازپین ها یکی از شایع ترین داروهایی است که در زمینه های نورولوژی و روانپزشکی مورد استفاده قرار می گیرد.از مهمترین کاربرد این دارو ها می توان به درمان اختلالات اضطرابی و بی خوابی اشاره کرد.مطالعات اخیر نشان داده اند که این داروها فقط در درمان های کوتاه مدت اختلالات اضطرابی بهترین اثر را داشته اند و استفاده از این دارو ها در درمان های بلند مدت به علت وجود عوارضی (مانند ایجاد وابستگی در مصرف،زیان رساندن به دستگاه سایکوموتور،اختلالات حافظه ای،سرگیجه،عدم تعادل و دیس آرتری) موفقیت آمیز نبوده است(11). مهارکننده های انتخابی سروتونین (SSRI) از جمله دیگر داروهایی هایی است که امروزه برای اهداف درمانی اضطراب به کار برده می شوند.این داروها بر طیف گسترده ای از اختلالات اضطرابی اثر میگذارند با این وجود که اثرات درمانی آنها با مقدار متنوعی از عوارض جانبی همراه است مانند:تغیرات وزنی،بی خوابی،خواب آلودگی،بی قراری، خستگی،خشکی دهان،مشکلات گوارشی،سردرد و..علاوه بر این مطالعات اخیر نشان داده که میزان موفقیت داروهای ضد افسردگی در درمان حدودا 50 درصد می باشد.بنابراین ضررهای درمان های مداخله ای دارویی باعث شده تا درمان های دیگری از جمله درمان های گیاهی برای درمان این گونه اختلالات مورد بررسی قرار گیرد(10). علیرغم وجود طیفی از داروها جهت کنترل اضطراب اما همچنان کنترل اضطراب از چالش های درمان طبی محسوب می شود و از طرف دیگر مصرف این داروها با عوارض جانبی زیادی همراه است بنابراین لازم است مطالعاتی جهت شناسایی و معرفی ترکیبات جدید بویژه با منشا طبیعی که انتظار می رود با عوارض جانبی کمتری همراه باشند دارای اهمیت زیادی است. بنابراین با توجه به آنچه که گفته شد مطالعه حاضر به منظور بررسی خواص آنتی اکسیدانی، تعیین اثرات ضد اضطرابی و نیز اندازه گیری مواد موثره عصاره هیدروالکلی گیاه کلزا طراحی شده است. فهرست منابع و مراجع علمی داخلی فهرست منابع و مراجع علمی خارجیمنابع و ماخذ: # عنوان منبع و ماخذ 1 (1) BaramanKalyanaraman, Teaching the basics of redox biology to medical and graduate students: oxidants, antioxidants, and disease mechanisms, Redox Biology 1, P.244-257, 2013 2 (2) Aruna Prakash, PhD, Fred Rigelhof and Eugene MIller, PhD, Antioxidant Activity, Medallion Laboratories 3 (3) RafaelCampos-Rodríguez1,MarycarmenGodínez-Victoria1,EdgarAbarca-Rojano1,JudithPacheco-Yépez1,HumbertoReyna-Garfias1, ReynaElizabethBarbosa-Cabrera1,MariaElisaDrago-Serrano2*Stress modulates intestinal secretory immunoglobulin AREVIEW ARTICLE published: 02December2013 doi: 10.3389/fnint.2013.00086 4 (4) Si Jin,1 YongzhongWu,2 Shiwei Deng,3 Jinxiang Zhang,4 and Xiao Qian Chen5 Oxidants and Antioxidants in Metabolic Syndrome and Cancer Hindawi Publishing Corporation Oxidative Medicine and Cellular Longevity Volume 2014, Article ID 178962, 3 pages 5 (5) Paul J. Lucassen • Jens Pruessner • Nuno Sousa • Osborne F. X. Almeida • Anne Marie Van Dam • GrazynaRajkowska • Dick F. Swaab • BoldizsárCzéh Neurology of stress 19 August 2013 / Accepted: 26 November 2013 / Published online: 8 December 2013 6 (6) Aurelia Magdalena Pisoschi1* and Gheorghe Petre Negulescu2 Methods for Total Antioxidant Activity Determination: A Review Pisoschi and Negulescu, Biochem& Anal Biochem 2011, 1:1 7 (7) BATSCA,Barros,CArvalho,Ferreira,Nutritional and nutraceutical potential of rape (Brassica napus L.VAR.napus)and tranchuda cabbage (brassica oleraceae L.var.costata)inflorescences,Food Chem TOxicol.2011 jun Pages49(6) 8 (8) FLAVONOIDS - FOOD SOURCES AND HEALTH BENEFITS Aleksandra Kozłowska1, Dorota Szostak-Węgierek2*RoczPanstwZaklHig 2014;65(2):79-85 9 Scott Stossell,Living with anxiety,Journal of mental health awareness vol.3 no.1 2014.9 10 (10) RavidDoronDafnaLotan , AnatRak-Rabl, AdiRaskin-Ramot , Karen Lavi , Moshe RehaviAnxiolytic effects of a novel herbal treatment in mice models of anxietyLife Sciences 90 (2012) 995–1000 11 (11) Malcoln H.Lader.Limitation on the use of banzodiazpines in anxiety and insomnia:are they justified?,European Neuropsychopharmacology 9 suppl.6 (1999) pages(399 to 405) 12 (12) PRAVEEN K. RAMAMOORTHY, AWANG BONO 13 (13) Si Jin, YongzhongWu, Shiwei Deng, Jinxiang Zhang, and Xiao Qian ChenOxidants and Antioxidants in Metabolic Syndrome and CancerHindawi Publishing Corporation Oxidative Medicine and Cellular Longevity Volume 2014, Article ID 178962, 3 pages 14 (14) Alfredo Aires, ConceiçãoFernandes , Rosa Carvalho , Richard N. Bennett 15 AtishiUsami,Ryotamotooka,Aumitakagi,Hiroshinakahashi,YoshiharuOkuno and MitsuMiyazawa,Chemicalcomposition,AromaEvaluation,andOxcygenRadicalAbsorbance Capacity ofVolatileoilExtracted from Brassica rapacv.Yukina used inJapanese Traditional food,Journal of Oleo Science 2014 Number.7.pages 723-730 16 Muhammad Jahangir,Hyek.kim,YoungH.Choi,and Robert Verpoorte,Health-affecting compounds inBrassicanapusInsiitue of food Technology,10/3/2008 vol.8.pages 31 to43 17 Sagnuwan,some medical palnts of Arabiabpennisula,cancerandmetastasis Review,21(2002)231-255 18 A.Choudhary,K.Nagaria,P.s.Naruka, O.P.Mahatma, Anti inflammation andAnalgesic activity of whole plant of Brassica Oleraccs LINN VAR.CapitataRubra(res cabbage) in rats Journal ofGlobalPharma Technology,1 (2009) 30-35 19 شیروانی آزاده،مقدم نیا علی اکبر،اثر ضد دردی اندام های هوایی کلزا در موش های سفید کوچک آموزشگاهی،پایان نامه34. حیدری نیما، قاسمی المیرا، مهدی پور حبیب، صالحی بقیه ا..،صوفی آبادی محمد، ارمی الهه،اژدری حسن،اثرات مختلف استرس حاد و مزمن ناشی از بی حرکتی روی آزمون فرمالین در موش صحرایی نر 20 حیدری اورنجقی نیما،قاسمی المیرا،مهدی پور حبیب ا..،صالحی بقیه ا..،صوفی آبادی محمد،الهه ارمی،اژدری زرمهری حسن،اثرات مختلف استرس حاد و مزمن ناشی از بی حرکتی روی آزمون فرمالین در موش صحرایی نر،مقاله پژوهشی،91/1/19 21 Komada M Takao K MiyakawaT,Elevated plus maze for mice,J Vis Exp. 2008 Dec 2 Pii:1088. Doi: 10.3791/1088 pubmed 22 Dr.MariaGulinello,Behavioral core protocols and training,Albert Einstein college of medicine,2005 23 Flausino OA, Zangrossi H, Salgado JV, Viana MB. Effects of acute and chronic treatment with Hypericumperforatum L.(LI 160) on different anxiety-related responses in rats. Pharmacology Biochemistry and Behavior. 2002;71(1):251-7. 24 وفایی ع، ملاشاهی ز، زاهدی خراسانی م، طاهریان ع. ارزیابی اثر عصاره تام هیدروالکلی گیاه شنبلیله برمیزان اضطراب و خواب در موش سوری. مجله دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی سبزوار. 1387؛15(4):72-65. 25 NeerajGilhotra a, Dinesh Dhingrab.Possible involvement of GABAergic and nitriergic systems for antianxiety-like activity of piperine in unstressed and stressed mice. Pharmacol Rep. 2014;66(5):885-91. 26 Atulkaushik,chandereshJijta,Jeevan J Kaushik,RobelZeray,AnghesonAmbesajir and LwanBeyence.FRAP assay and effect of Diplaziumesculentum(a green vegetable of North india)on nervouse central system,Indian Journal of Natural products and Resources Vol. 3(2), June 2012 pp.228 231 27 Iris F. F. Benzie and J. J. Strain, The Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) as a 28 طایفی نصرآبادی ح، خدارحمی ر. ارزیابی دو روش TRAP و FRAP جهت تعیین پتانسیل آنتی اکسیدانی تام سرم موش صحرایی. یافته. 1386؛ 9 (3): 47-41. 29 برادران م، اشرف پور م، رضایی ح، سفیدگر ع، شریفی ح. بررسی فعالیت آنتی اکسیدانی عصاره های مختلف گیاه Artemisia Annua اطراف شهر بابل. مجله دانشگاه علوم پزشکی سبزوار. 1393؛ 21 (4): 539-529. 30 SagarB.kedare and R. P. Singh,Genesis and development of DPPH method of antioxidant assay,J Food Sci Technol,Vol48(4),2011 Aug;Page 412-422 31 Dr. Marsha J. Lewis ,Antioxidant screen for extracts,Protocol No:15.3b Natural product screening,5 November 2012: version 32 Hasani P, et al. "In vivo antioxidant potential of Teucrium polium, as compared to α-tocopherol." Acta pharmaceutica. 2007; 57(1): 123-129. 33 سیاهپوش ا، امرایی ف، گل فخر آبادی ف. بررسی فعالیت آنتی اکسیدانتی فراکسیون های مختلف اندام هوایی گیاه گز خوانسار (AstragalusbrachycalyxFischer). مجله علمی پزشکی. 1389؛ 9 (3): 277-271. 34 خدا رحمی پروین,سرهرودی شادی.بررسی اثر بنزودیازپین ها بر اظطراب و تداخل آن با هیستامین در مدل ماز بعلاوه ای شکل در موش صحرایی.مجله بیوتکنولوژی سلوتی مولکولی دوره سوم شماره یازدهم تابستان92 35 Akhtary Z, Rashidy-Pour A, Vafaei AA, Jadidi M. Effects of extremely low-frequency electromagnetic fields on learning and memory and anxiety-like behaviors in rats. Koomesh. 2011;12(4): Pe435-Pe446. خلاصه نتیجه اجرای طرح سابقه علمی طرح و پژوهشهای انجام شده با ذکر مأخذ به ویژه در ایران خلاصه طرح طبق اهداف پیش بینی شده WhatRequirementsAreMet ملاحظات گروه ملاحظات ناظر HomeAddress WorkPlace aAbstract مهمانان جلسه دستور جلسه آینده دستور جلسه چکیده پایان نامه خلاصه

-->

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
10.htm1394/09/30160971دانلود